bigpo.ru
добавить свой файл
1
Лабораторное дело

Специальность 111201 «Ветеринария»

Специализация «Биотехнология производства биопрепаратов»


Пояснительная записка

«Лабораторное дело» - учебная дисциплина, относящаяся к циклу ДС (дисциплины специализации. Функциональное назначение учебной дисциплины - дать студентам факультета ветеринарной медицины теоретические знания и практические навыки по основным методам лабораторной диагностики бактериальных и вирусных болезней сельскохозяйственных животных, методам бактериологических, серологических и вирусологических исследований.

ГОСВПО по специальности 111201 «Ветеринария», учебный план КГСХА по специальности 111201 «Ветеринария».

Цель курса - изучение студентами программы курса по лабораторному делу

Задачи курса - получение фундаментальных знаний в области методов прикладной бактериологии, вирусологии, серологической лабораторной диагностики.

Согласно требованиям квалификационной характеристики студенты должны иметь представление:

- о нормативных распорядительных документах, определяющих структуру и организацию работы лабораторий;

- о Правилах ветеринарно-санитарного режима;

- об основах техники безопасности при работе в бактериологической и вирусологической лабораториях;

- о перечне микробиологических, иммунологических, серологических и других видов исследований, проводимых в лабораториях;

- о методах приготовления мазков для исследования морфологических и тинкториальных свойств выделенных культур, приготовления реактивов и окраски мазков;

- о классификации культур по морфологическим и тинкториальным свойствам;

- о правилах выполнения смывов и посевов при проведении санитарно-бактериологических исследований и исследований на стерильность;

- о правила работы с инфекционным материалом;

  • методы обеззараживания инфекционного материала;

  • методы стерилизации посуды и питательных сред;

- методы приготовления питательных сред для первичного посева
материала и идентификации выделенных бактерий;

- методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам с помощью бумажных дисков и методами серийных разведений в плотной и жидкой питательной средах;

- правила техники безопасности, производственной санитарии при
работе в микробиологической лаборатории.

Студенты должны знать:

- порядок регистрации образцов для исследования и результатов анализа;

- использование нормативно-справочной литературы по соответствующим разделам гигиены и санитарии;

  • приготовление и стерилизация питательных сред для первичного посева проб и идентификации выделенных культур;

  • посев материала, поступившего на исследование;

  • подготовка и окрашивание мазков для бактериоскопии, прямой и непрямой иммунофлуоресценции, для исследований с помощью иммуноферментного анализа;

  • посев чистой культуры и раскладывание бумажных дисков на плотные питательные среды для определения отношения микроорганизмов к антибактериальным препаратам;

  • санитарно-бактериологические исследования объектов внешней среды (окружающей);

  • работа с лабораторными животными;

  • приготовление дезрастворов и правильность их применения;

  • обеззараживание отработанного материала;

Студенты должны владеть:

- основами лабораторной техники (работа с лабораторной посудой, методы осаждения, фильтрации, центрифугирования и др.);

- методиками дезинфекции лабораторных помещений, стерилизации материалов и оборудования;

  • методиками приготовления и контроля питательных сред;




  • методиками культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях;

  • методами подготовки вируссодержащего материала, заражения культуры клеток, оценки цитопатогенного действия вируса.

При освоении дисциплины студенты ознакомятся с лабораторными методами непосредственно в профильных лабораториях.

Студенты должны иметь практические навыки:

- проведения стерилизации материалов и оборудования, обезвреживания производственных отходов;

- посевов и культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях; подготовка и окрашивание мазков для бактериоскопии;

- постановки серологических реакций (ИФА, РА, РГА, РИГА, РТГА, РИД, РСК).


Объем дисциплины и виды учебной работы

Вид учебной работы

Всего часов

Общая трудоемкость

174

Вид итогового контроля: зачет

8 семестр


Тематический план

Очная форма обучения





Наименование разделов и

тем



Всего часов трудоемкости



В том числе аудиторных

Само­стояте­льная работа



всего

лек­ции

лабора­торные занятия

1 модуль

Раздел «Прикладная бактериология»

1.

Ознакомление с вивариями чистых и зараженных животных, рационами кормления и содержания животных, соблюдением ветсанправил. Помещение вскрывочной трупосжигательной печи. Баккухня. Правила работы и поведение в лаборатории.

11

3

2

1

8

2.


Порядок приема патологического материала, транспортировки, сохранения и доставки в лабораторию. Порядок вскрытия, проведение высевов на питательные среды.

8

3

1

2

5

3.

Микроскопические методы исследования, изготовление мазков, их окрашивание и просмотр. Рост культур микроорганизмов на плотных и в жидких питательных средах. Перечень характерных для Е. coli колоний на МПА, изготовление мазков и их просмотр. Ознакомление с техникой отдела.



8

3

1

2

5


4.

Понятие о чистых культурах. Изготовление антигенов из чистых культур.

Стандарт мутности.



10



3



1



2



7

5.

Оценка биохимических свойств выделенной культуры.

Цветной ряд для определения биохимических свойств и высевы культур.


9

3

1

2

6

6.

Порядок оформления документации. Работа с определителем бактерий.

9

3

1

2

6

2 модуль

Раздел «Прикладная вирусология»



7.

Вирусологический отдел и правила работы с вирусными культурами. Ознакомление с помещениями и оборудованием вирусологического отдела. Диагностика бешенства методом иммунофлуоресценции и обнаружение телец Бабеше-Негри.

10

3

1

2

7

8.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА). Определение уровня антител к вирусу Ньюкаслской болезни в РТГА.

13

5

1

4

8

9.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). Постановка РНГА на трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС).

9

3

1

2

6

10.

Иммуноферментный анализ. Постановка и учет ИФА при лабораторной диагностике ретровирусной инфекции.

10

3

1

2

7

11.

Использование культур лееток в вирусологии.

Получение культуры клеток, подсчет клеток, посадка на матрикс, культивирование, постановка РДП на ИББ.

10

3

1

2

7

12.


Использование развивающихся куриных эмбрионов (РЭК) в вирусологии. Выделение вирусов на РЭК.

12

4

2

2

8

Раздел «Серологическая лабораторная диагностика»

13.

Ознакомление с помещениями и оборудованием серологического отдела, правила работы в отделе.

Реакция агглютинации (РА), постановка РА (пластинчатой, пробирочной).

9

3

1

2

6

14.


Реакция связывания комплемента. Постановка РСК.

16

9

2

7

7

15.

Твердофазный иммуноферментный анализ. Постановка ИФА для выявления антител к вирусу инфекционного бронхита кур.



10

3

1

2

7

16.

Реакция по Асколи. Постановка реакции по Асколи.

10

3

1

2

7

17.

Реакция микроагглютинации лизиса (РМАЛ). Исследование на лептоспироз.

10

3

1

2

7

ИТОГО

174

60

20

40

114

Форма итогового контроля

Зачет



Список рекомендуемой литературы



  1. ГОСТ 28085-89. Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности– М., Стандартинформ, переиздание, 2007. – 7 с.

  2. Гордон Ада, Алистер Рамсей. Вакцины, вакцинация и иммунный ответ. (перевод с английского) – М.: Медицина, 2000. – 344 с.

  3. Животная клетка в культуре: методы и применение в биотехнологии / Г.Т. Акиншина, В.С. Белоконь, Н.М. Билько и др.; Под ред. Л.П. Дьяконова. – М.: Компания Спутник+, 2009. – 652 с.

  4. Иммунология. Учебное пособие для проведения лабораторных работ и самостоятельной работы студентов» / В.Е. Козлов, В.М. Безгин, Н.Н. Быкова и др. – Курск: Изд-во КГСХА, 2009. – 56 с.

  5. Кисленко В.Н. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М. КолосС, 2005. – 232 с

  6. Корнев И.И. Стерилизация изделий медицинского назначения – М.: Человек, 2003. – 156 с.

  7. Лабораторное дело. Учебно-методическое пособие для проведения лабораторных работ и самостоятельной работы студентов» / В.Е. Козлов, В.М. Безгин, А.В. Сверчков и др. – Курск: Изд-во КГСХА, 2009. – 88 с.

  8. Практикум по микробиологии: Учебное пособие для вузов / А.И. Нетрусов, М.А. Егорова, Л.М. Захарчук и др.; Под ред. А.И. Нетрусова – М.: Издательский центр «Академия», 2005. – 603 с.

  9. Практикум по основам биотехнологии: Учебно-методическое пособие для студентов, обучающихся по специализации «Биотехнология производства биопрепаратов» / В.М. Безгин, В.Е. Козлов, А.В. Сверчков и др. – Курск: Изд-во КГСХА, 2009. – 52 с.

  10. Теоретические и практические основы технологии сублимационного высушивания биопрепаратов / А.А. Нежута, Э.Ф. Токарик, А.Я. Самуйленко и др. – Курск: Издательство КГСХА, 2002. – 239 с.


Интернет-ресурсы

    1. “All Virology on the WWW”: www.virology.net

    2. http://www.biomednet.com/

    3. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/

    4. http://microbiol.org/vlmicro/index.htm

    5. http://www.freemedicaljournals.com/htm/index.htm

    6. http://golgi.harvard.edu/biopages/biochem.html

    7. http://www.rusmedserv.com/